廊坊市城市规划管理暂行办法
河北省廊坊市人民政府
廊坊市城市规划管理暂行办法
第一章 总 则
第一条 为科学制定城市规划，加强城市规划管理，合理进行城市建设，根据《中华人民共和国城市规划法》、《河北省城市规划条例》等有关规定，结合本市实际，制定本办法。
第二条 凡在本市行政区域内制定和实施城市规划，在城市规划区内进行建设，适用本办法。
第三条 本办法所称城市，是指国家按行政建制设立的市、镇。
本办法所称城市规划区，是指城市市区、近郊区以及城市行政区域内因城市建设和发展需要实行规划控制的区域。本市城市规划区范围为：城区、廊坊经济技术开发区、万庄区、北史家务乡、南尖塔乡、北旺乡、杨税务乡、九州镇、白家务办事处。县（市）的城市规划区，由县（市）人民政府界定。
第四条 城市规划必须符合市情、县（市）情，适应社会主义市场经济发展的需要，依据本市国民经济和社会发展规划，正确处理近期建设与长远发展的关系，合理控制市区规模，坚持科学布局、提高城市整体功能的原则。
第五条 编制城市规划必须保护文物古迹、自然景观、城市风貌，必须合理用地、节约用地，加强城市绿化建设，提高和改善环境质量，并与国土规划、区域规划、土地利用总体规划相协调。
城市规划确定的城市基础设施项目和城市综合开发建设项目，应当纳入城市国民经济和社会发展规划，按计划、分步骤实施。
第六条 廊坊市城市规划行政主管部门负责本市行政区域内城市规划管理工作；各县（市）人民政府城市规划行政主管部门负责辖区内城市规划管理工作，接受市规划行政主管部门的业务指导。
各级城市规划行政主管部门的主要职责是：
（一）贯彻执行国家、省和市关于城市规划的法律、法规、规章和政策，拟定城市规划的规范性文件；
（二）组织编制城市总体规划、分区规划、详细规划和城市设计；组织协调有关部门编制各专项规划；指导各县（市）编制城镇体系规划、县镇总体建设规划；
（三）参与建设项目建议书和可行性研究工作，负责本行政区域内建设项目的选址规划管理，核发选址意见书；
（四）负责城市规划区范围内建设用地和建设工程的规划管理，核发建设用地规划许可证、建设工程规划许可证；
（五）负责城市规划区已经审批项目的放线、验线、验槽、竣工验收。
廊坊经济技术开发区内的工业项目“一书两证”，由市城市规划行政主管部门委托开发区规划行政主管部门办理；并委托开发区规划行政主管部门负责工业项目的放线、验线、验槽、竣工验收；其他建设项目“一书两证”由市规划行政主管部门审批，并负责项目的放线、验线、验槽、竣工验收。
县城以下建制镇人民政府负责本行政区域内的城市规划管理工作。
第七条 单位和个人有遵守城市规划的义务，有对违反城市规划的行为进行检举和控告的权利。
第二章 城市规划的编制与审批
第八条 编制城市规划，必须进行调查研究、科学预测和技术经济论证；科学、合理地确定城市性质、发展目标和发展规模；应当使主要建设标准、定额指标和开发程序，同本地的经济发展水平相适应，并符合建设用地控制指标要求。
第九条 廊坊市城市总体规划由廊坊市人民政府组织编制，按《中华人民共和国城市规划法》、《河北省城市规划条例》的规定报批。
各县人民政府所在地的镇的总体规划，由各县人民政府负责组织编制，报市人民政府审批。县级市的城市总体规划由本级人民政府负责组织编制，经市人民政府审查同意后，报省人民政府审批。
县城以下建制镇的总体规划由镇人民政府会同各县（市、区）城市规划行政主管部门组织编制，报县（市、区）人民政府审批，并报市城市规划行政主管部门备案。
各县（市）人民政府在向上级人民政府报批城市总体规划前，须经同级人民代表大会或常务委员会审查同意。
第十条 廊坊市区分区规划和控制性详细规划由市城市规划行政主管部门负责组织编制，报市人民政府审批。县（市）人民政府所在地镇的控制性详细规划由县（市）城市规划行政主管部门组织编制，报同级人民政府审批，并报市城市规划行政主管部门审查备案。
其他建制镇的详细规划，由镇人民政府负责组织编制，报县级人民政府城市规划行政主管部门审批。
近期建设区域应当编制修建性详细规划。建设单位在向城市规划行政主管部门取得规划设计要点后，委托具有相应规划设计资格的单位编制修建性详细规划。修建性详细规划由城市规划行政主管部门审批。
第十一条 廊坊市区及各县（市）区域内的铁路客站，大型广场，文化、体育中心，大中专院校，象征城市的雕塑、纪念碑的详细规划设计方案，须经专家充分论证后，分别报市、县（市）人民政府批准。
第十二条 抗震、人防、消防等专业规划，由其主管部门根据城市总体规划编制，经同级城市规划行政主管部门综合平衡，按规定报有关部门批准后，纳入城市总体规划。
第十三条 经过批准的城市总体规划，由组织编制的城市人民政府公布。
第十四条 城市总体规划在实施中需要进行局部调整或变更城市性质、规模、发展方向和总体布局的，按《河北省城市规划条例》有关规定执行。
经批准的城市总体规划，任何单位和个人不得擅自调整和变更。
第三章 城市新区开发和旧区改建
第十五条 城市新区开发和旧区改建必须坚持统一规划、合理布局、综合开发、配套建设的原则，坚持经济效益、社会效益和环境效益的统一。各项建设工程的选址、定点，不得妨碍城市的发展和安全，污染和破坏城市环境，影响城市各项功能的协调。
第十六条 城市新区开发应当具备水资源、能源、交通、防灾等建设条件，节约土地及空间资源，合理利用城市现有设施。
各类开发区的规划与建设，必须纳入城市的统一规划与管理。
新区开发应当按照先地下后地上的程序组织实施，同时配建公用设施和城市环卫、商业、文化、卫生等设施。
第十七条 城市旧区改建应当统筹安排，统一规划，分期实施，加强基础设施和公共设施建设，提高城市的综合功能。旧区改建的重点是市政公用设施简陋、交通不畅、环境污染严重以及居住生活条件较差的区域。
第十八条 城市旧区内不得新建有污染的项目。对现有污染环境和影响居民安全、生活安宁的污染源，应当限期治理，治理期间不得进行与治理无关的扩建工程。
第四章 城市建设用地规划管理
第十九条 城市规划区内的土地利用和各项建设必须符合城市规划，服从规划管理。城市人民政府根据城市规划实施的需要做出的调整用地决定，任何单位和个人都必须执行。
第二十条 任何单位和个人必须严格按照规划确定的土地使用性质和界线使用土地，确需改变土地使用性质、调整界线的，由原土地使用权单位向城市规划行政主管部门提出申请，城市规划行政主管部门提出审查意见，报城市人民政府批准。依法取得土地使用权的单位，按相关规定办理建设项目审批手续。其他任何单位和个人均无权以各种方式擅自变更土地使用性质。
第二十一条 严禁擅自占用城市道路、公共绿地、公共活动用地、广场、河道、水库和泄洪区，损毁古树名木、占压地下管线或其它设施进行建设。
第二十二条 各级发展改革部门在审批建设项目建议书时，应当征求同级城市规划行政主管部门的意见；各项设计任务书在报请批准时，必须附有同级城市规划行政主管部门的建设项目选址意见书。
建设项目的选址，由城市规划行政主管部门会同国土、环保、消防、文物等有关部门共同进行。
第二十三条 任何单位和个人在城市规划区内进行建设，必须向建设项目所在地的城市规划行政主管部门申请领取建设用地规划许可证，并按下列程序办理：
（一）国土资源管理部门在招标、拍卖、挂牌出让土地前，应当向城市规划行政主管部门申请该地块的规划设计要点；
（二）属非经营性用地的，建设单位或个人中标后持建设项目的有效文件，填写建设用地选址申请书，向城市规划行政主管部门申请选址定点；
（三）城市规划行政主管部门根据建设项目的性质、规模及其他要求确定建设地点，核发建设项目选址意见书；
（四）建设单位或个人依据城市规划行政主管部门出具的规划设计要点委托具有相应设计资质的设计单位设计总平面图，由城市规划行政主管部门审查批准后核发建设用地规划许可证，在取得建设用地规划许可证后，向县级以上人民政府国土资源管理部门申请办理用地手续。
第二十四条 住宅建设按居住区规划综合开发，市政公用设施应当与住宅建筑同步规划、同步设计、同步建设，居住区各项建设用地由开发单位统一办理用地手续。
第二十五条 城市规划区内农村的单位和个人，需要占用集体所有的土地或者国有土地新建中小企业和公共建筑、公用设施以及住房的，应当按照城市规划要求，统一规划设计，办理建设用地规划许可证后，向县级以上人民政府国土资源管理部门办理用地手续。
在城市近郊区范围内，农村居民建设住宅的，须符合村镇规划，由乡（镇）人民政府出具规划审核意见后，向县级以上人民政府国土资源管理部门办理用地手续。
市政公用设施和城市绿化需要通过或占用集体或个人使用的土地时，任何单位和个人不得阻挠。
第二十六条 使用城市规划区内的土地进行临时建设，必须向城市规划行政主管部门提出申请，经审查核准领取临时建设用地规划许可证后，方可向当地国土资源管理部门办理临时用地手续。
临时用地的期限一般不超过2年，使用完毕后应当自行拆除临时建筑物、构筑物。因特殊原因确需延期使用的，应当在使用期满前2个月办理延期使用手续。
第二十七条 在城市规划区内出让、转让城市国有土地使用权，必须符合城市规划。出让的地块，必须具有城市规划行政主管部门提出的规划设计条件及附图。规划设计条件及附图，出让方和受让方不得擅自变更。在出让、转让过程中确需变更的，必须经过城市规划行政主管部门批准。
第五章 城市建设工程规划管理
第二十八条 在城市规划区内新建、扩建、改建各项建设工程，须向城市规划行政主管部门申请领取建设工程规划许可证后，方可申请办理开工手续。申请建设临时性工程，发给临时建设工程规划许可证。
第二十九条 建设单位申请领取建设工程规划许可证按下列程序办理：
（一）建设单位向城市规划行政主管部门提交书面申请，同时提交建设项目的有效文件、土地使用权证书；城市规划行政主管部门划定拟建工程的规划设计范围或建设位置及道路红线，提出规划设计要点；
（二）建设单位根据城市规划行政主管部门提出的规划设计要点，委托具有相应资质的设计单位进行设计；公建项目或城市规划行政主管部门指定的其他建设项目，应当报送设计方案或初步设计，设计方案不得少于2个，经城市规划行政主管部门审查同意后，发给设计方案审定通知书，进行施工图设计；
（三）建设单位填报建设工程规划申请书，附送拟建工程施工图，城市规划行政主管部门审查同意后，核发建设工程规划许可证。
第三十条 建设单位在申请领取建设用地规划许可证和建设工程规划许可证时，应当依法向城市规划行政主管部门缴纳旧城改造费、市政公用设施配套费。
第三十一条 各类建筑物、构筑物的位置、高度，应当符合电台、电视台、地震台、气象台、微波传输站、飞机场、军用设施、收发讯区等空间、环境技术要求。工程设计必须符合有关专业规定、规范。
第三十二条 在城市规划区内开发矿产资源，进行挖取砂石、土方和回填坑塘、河渠，填埋废渣、垃圾等改变地貌的活动，必须经有关主管部门批准。
进行上述行为时不得破坏城市环境和城市基础设施，影响城市规划的实施。
第三十三条 城市规划区内，任何单位和个人不得擅自凿井取水；因特殊情况需要凿井的，应当经城市水资源管理部门同意，报城市规划行政主管部门核准，发给许可证后方可施工。
第三十四条 禁止在厂区、教学区、医疗区、文化体育活动区等插建住宅。
住宅的日照间距按国家现行居住区设计规范执行。
第三十五条 沿城市道路新建或者改建建筑物、构筑物，必须符合道路规划红线及城市规划行政主管部门提出的后退红线的要求。
在规划道路的红线范围内，禁止兴建永久性建筑物、构筑物和其他设施。
第三十六条 建设大中型商场、宾馆、饭店、展览馆、博物馆、体育馆、影剧院、医院等公共建筑，建设单位须同时建设相应的停车场。
所有临街建设单位须按城市规划的要求，负责门前绿化和铺砌相临的人行便道。
第三十七条 沿城市道路铺设的各种管线，应当严格按城市规划确定的走向、位置、标高、管径铺设。
同一路径上的同类线路应当同沟铺设，有关使用单位共同投资修建，或一方投资修建其他单位可有偿使用，无特殊原因不得另设。
第三十八条 新建桥涵、隧道须按规划同时建设管线穿越设施。
第三十九条 建设单位在领取建设工程规划许可证后，应当在6个月之内开工建设。因故不能在规定期限内开工建设的，应当向城市规划行政主管部门提出延期申请。
第四十条 建设单位和施工单位应当按照建设工程规划许可证和批准的图纸施工；确需变更的，须由原设计单位出具变更设计图纸文件，报城市规划行政主管部门核准。
第四十一条 建设工程开工建设前和基础工程、隐蔽工程完成后，建设单位和施工单位须报城市规划行政主管部门验线，经核准后方可施工。
第四十二条 施工单位和建设单位在施工中发现文物古迹、隐蔽管线、构筑物的，须立即停工，保护好现场，并通知有关部门到现场处理。对没有履行职责，造成严重后果的，由施工单位和建设单位承担相应责任。
第四十三条 城市规划行政主管部门应当参加城市规划区内重要建设工程的竣工验收。城市规划区内的建设工程，建设单位应当在竣工验收后6个月内向城市规划行政主管部门报送有关竣工资料。
第四十四条 建设用地范围内的原有建筑物、构筑物，除城市规划行政主管部门在核发建设工程规划许可证时准许保留的以外，建设单位必须在建设工程开工前全部拆除；暂时保留作为施工用房的，工程竣工后必须及时拆除。
临时搭建的施工设施必须在建设工程验收前拆除。
第四十五条 城市便道上的花池、绿地与管线施工发生矛盾时，应当服从施工需要。建设单位负责恢复或者赔偿恢复所需费用。
第四十六条 城市规划行政主管部门对城市规划区的建设工程是否符合规划要求进行检查时，被检查者应当如实提供情况和必要的资料。检查者有责任为被检查者保守技术秘密和业务秘密。
第六章 法律责任
第四十七条 在城市规划区内,未按本办法规定办理规划审批手续而取得建设用地批准文件占用土地的，批准文件无效，占用的土地由县级以上人民政府责令退回；其建设的各类建筑物、构筑物和其他设施应当依法限期拆除。
第四十八条 在城市规划区内未取得建设工程规划许可证或违反建设工程规划许可证的规定进行建设的，根据影响城市规划的程度，分别作出下列处理：
（一）严重影响城市规划，危害居住环境，侵犯公共利益，侵占城市道路红线、公共绿地、广场、河道、占压地下管线的，由有关部门责令停止建设，限期拆除或没收违章建筑物、构筑物及其他设施；
（二）影响城市规划，尚可采取补救措施的，由有关部门责令限期改正，并处土建工程费用总额10%以下罚款。
第四十九条 当事人应当在规定的期限内缴纳罚款；逾期不缴纳的，每日按罚款数额的3%加处罚款。罚款上缴同级财政。
第五十条 当事人接到停止施工通知书后，应当立即停止施工；继续施工的，由有关部门依法强制拆除。
第五十一条 对未取得建设工程规划许可证或违反建设工程规划许可证的规定进行建设的单位主管负责人和直接责任者，由其所在单位或其上级主管部门给予行政处分。
第五十二条 建设单位报送的地下工程竣工资料图纸与实际不符，导致其他工程利用该资料造成损失的，报送单位应当承担经济责任；造成严重后果，构成犯罪的，由司法机关依法追究有关人员的刑事责任。
第五十三条 城市规划行政主管部门和城市管理综合执法部门工作人员玩忽职守、滥用职权、徇私舞弊的，由其所在单位或上级主管部门给予行政处分；构成犯罪的，由司法机关依法追究刑事责任。
第五十四条 当事人对行政处罚决定不服的，可以依法申请行政复议或提起行政诉讼；逾期不申请复议，也不向人民法院起诉，又不履行处罚决定的，由作出处罚决定的部门申请人民法院强制执行。
第七章 附 则
第五十五条 本办法所称建设工程，是指建筑物、构筑物以及道路、桥梁、铁路、各类管线和其他工程设施。
第五十六条 本办法自2006年2月10日起施行。《廊坊市城市规划管理实施办法》（廊政[1994]14号）同时废止。
关于印发《血液制品去除／灭活病毒技术方法及验证指导原则》的通知
国家食品药品监督管理局
关于印发《血液制品去除／灭活病毒技术方法及验证指导原则》的通知
国药监注[2002]160号
各省、自治区、直辖市药品监督管理局：
为防止肝炎、艾滋病等血源性传播疾病随血液制品的应用而传播，保证临床使用安全，我局组织有关单位和专家制定了《血液制品去除／灭活病毒技术方法及验证指导原则》，现予印发，请遵照执行并转发至辖区内各有关单位。
国家药品监督管理局
二○○二年五月九日
血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导原则
目前已知经血液制品传染的病毒主要有HBV、HCV、HIV-1、HIV-2、HTLV和细小病毒B19。尚未发现经血液制品传染CJD。但有少数研究报告发现有实验性传染现象，因此要密切关注CJD，特别是vCJD的发展动向。
为了提高血液制品安全性，生产工艺要具有一定的去除/灭活部分病毒能力，生产过程中应有特定的去除/灭活病毒方法。本技术指导原则是对血液制品（指以人血浆为原料制备的制品）生产过程以及特定的去除/灭活病毒方法验证的指导原则，包括指示病毒和病毒去除/灭活方法的选择、验证方案的设计、结果判定以及附录所列技术验证申报的程序。
一、去除/灭活病毒方法的选择
由于不同类血液制品潜在的污染病毒的可能性不同，为此选择病毒去除/灭活方法的侧重点也应有所不同：
（一）凝血因子类制品
生产过程中应有特定的能去除/灭活脂包膜和非脂包膜病毒的方法，可采用一种或多种方法联合去除/灭活病毒。
（二）免疫球蛋白类制品
对于免疫球蛋白类制品（包括静脉注射用人免疫球蛋白、人免疫球蛋白和特异性人免
疫球蛋白）生产过程中应有特定的灭活脂包膜病毒方法。但从进一步提高这类制品安全性考虑，提倡生产过程中加入特定的针对非脂包膜病毒的去除/灭活方法。
（三）白蛋白
采用低温乙醇生产工艺和特定的去除/灭活病毒方法，如巴斯德消毒法等。
二、常用的去除/灭活病毒方法评价
（一）巴斯德消毒法（巴氏消毒法）
1．人血白蛋白制品
几十年临床应用结果表明，白蛋白的巴氏消毒法对HIV和肝炎病毒是安全的。其病毒
灭活条件已很完善，可不要求进行病毒灭活验证。但是必须对巴氏消毒法所用设施进行验证，使巴氏消毒各参数符合要求（包括制品内温度分布的均一性和灭活时间）。
2．其它血液制品（液体制剂）
由于制品的组成、稳定剂（如：氨基酸、糖、枸橼酸盐等）及其浓度的不同，均会对
灭活病毒效果有一定的影响。因此在采用巴氏消毒灭活病毒方法时必须进行病毒灭活效果验证。
（二）干热法（冻干制品）
80℃加热72小时，可以灭活HBV、HCV、HIV和HAV等病毒。但应考虑制品的水分
含量、制品组成（如：蛋白质、糖、盐和氨基酸）对病毒灭活效果的影响。应确定允许的制品瓶间各参数的差异。病毒灭活用的干热箱至少每半年验证一次。验证时干燥箱内应设多个测温点（包括制品内、箱内最高和最低温度点）。
（三）有机溶剂/去污剂（S/D）处理法
有机溶剂，如：磷酸三丁脂（TNBP）和非离子化的去污剂，如：Triton X-100或吐温-
80结合可以灭活脂包膜病毒，但对非脂包膜病毒无效。常用的灭活条件是0.3%TNBP和1%吐温-80，在24℃处理至少6小时；0.3%TNBP和1%Triton X-100，在24℃处理至少4小
时。S/D处理前应先用1μm滤器除去蛋白溶液中可能存在的颗粒（颗粒可能藏匿病毒从
而影响病毒灭活效果）。加入S/D后应确保是均一的混合物。在灭活病毒全过程中应将温度控制在规定的范围内。如果在加入S/D后过滤，则须检测过滤后S/D的浓度是否发生变
化，如有变化应进行适当调整。吐温-80应采用植物源性，并应采用称量法量取。
（四）膜过滤法
膜过滤技术只有在滤膜的孔径比病毒有效直径小时才能有效除去病毒。该方法不能单
独使用，应与其它方法联合使用。
验证研究时应考虑蛋白溶液的浓度、滤速、压力和过滤量等重要参数。在过滤前及过
滤后应测试滤膜的完整性。
（五）低pH孵放法
研究表明，免疫球蛋白生产工艺中的低pH（如pH4）处理（有时加胃酶）能灭活几种
脂包膜病毒。灭活条件（如：pH值、孵放时间和温度、胃酶含量、蛋白质浓度、溶质含量等因素）可能影响病毒灭活效果，验证试验应该研究这些参数允许变化的幅度。
三、特定的去除/灭活病毒方法验证
（一）指示病毒的选择
首先，应该选择经血液传播的相关病毒（如：HIV），不能用相关病毒的，要选择与其理化性质尽可能相似的指示病毒；第二，所选择的病毒理化性质应有代表性（病毒大小、核酸类型以及有无包膜），其中至少应包括一种对物理和/或化学处理有明显抗性的病毒。在进行去除/灭活病毒验证时，应根据制品的特性及所采用的病毒去除/灭活工艺，参照下表列举的病毒选择适宜的指示病毒。所选择的指示病毒至少应包括HIV-1、HBV和HCV
模拟病毒以及非脂包膜病毒。水疱性口炎病毒（VSV）耐受的pH范围比较广，验证低pH孵放法灭活病毒效果时可选用此指示病毒。
经血液传播疾病的相关病毒及验证可选用的指示病毒（举例）
┌──┬───┬───┬──────┬──────────────┐
│病毒│基因组│脂包膜│大小（nrn） │ 指示病毒举例 │
├──┼───┼───┼──────┼──────────────┤
│HIV │ RNA │ 有 │ 80-100 │ HIV │
├──┼───┼───┼──────┼──────────────┤
│HBV │ DNA │ 有 │ 45 │鸭乙型肝炎病毒、伪狂犬病毒 │
├──┼───┼───┼──────┼──────────────┤
│HCV │ RNA │ 有 │ 40-60 │牛腹泻病毒、Sindbis病毒 │
├──┼───┼───┼──────┼──────────────┤
│HAV │ RNA │ 无 │ 27 │HAV、脊髓灰质炎病毒、脑心肌 │
│ │ │ │ │炎（EMC）病毒 │
├──┼───┼───┼──────┼──────────────┤
│B19 │ DNA │ 无 │ 20 │犬细小病毒、猪细小病毒 │
└──┴───┴───┴──────┴──────────────┘
（二）方案设计
1．去除/灭活病毒验证研究应符合GLP的要求。
2．研究影响去除/灭活病毒效果的参数（包括机械参数和理化参数）允许变化的幅度。
3．研究病毒灭活动力学，包括病毒灭活速率和灭活曲线。
4．指示病毒滴度应该尽可能高（病毒滴度应≥106/ml）。
5．加入的病毒与待验证样品体积比不能高于1∶9。
6．如可能，验证过程中每步取出的样品应尽快直接进行病毒滴定，不做进一步处理（如超离心、透析或保存、除去抑制剂或毒性物质等）。如果样品必须做进一步处理，或不同时间取出的样品要在同一时间进行测定，应考虑这些处理方法对病毒检测结果的影响。
7．检测方法可包括蚀斑形成、细胞病变（如合胞体或病灶形成）、终点滴定或其他方法。这些方法应该有适宜的灵敏度和可重复性，每一个取样点应取双份样品并设有对照以保证结果的准确性。
8．如果制品的生产工艺中包含了两步或两步以上病毒去除/灭活方法，应该分别进行
病毒灭活效果验证。
（三）观察指标
1．病毒方面
（1）去除/灭活病毒滴度；
（2）灭活病毒速率、灭活曲线。以列表和做图形式报告验证结果。
2．病毒去除/灭活各参数允许变化范围
3．蛋白质方面
（1）制品质量应符合《中国生物制品规程》或有关规定；
（2）采用适当方法测定蛋白质结构和功能活性的变化。如：制品比活性、IVIG的Fc
功能分析可了解蛋白质结构是否发生了变化；凝胶色谱法可检测蛋白质分子大小和形状的变化；蛋白质形状变化可导致扩散系数、沉降常数和粘度的改变；SDS-PAGE，特别是等电聚焦和PAGE结合（双向电泳）也是检测蛋白质结构变化的很好方法。
（3）如果采用新的去除/灭活方法（包括更换使用已认可的病毒灭活方法或国内外未
曾采用过的病毒去除/灭活方法），需对蛋白质半衰期和新免疫原性进行研究。要求如下：
半衰期：用适宜动物（如大鼠或家兔）和未经病毒去除/灭活的相同制品进行半衰期比较；
新免疫原性：新免疫原性用来检查蛋白质较高级别结构上的变化。这些变化不一定损
害蛋白质功能，但是会引起受体免疫反应。实验室检测新免疫原性是非常困难的。可用经和未经病毒灭活的蛋白分别免疫动物（如家兔），所产生的抗体交叉用未经和经病毒灭活的蛋白结合。如果经病毒灭活的蛋白抗体被未经病毒灭活的蛋白完全结合，说明不含新抗原。由于不能保证人类免疫系统识别的表位与实验动物相同，因此推荐在Ⅳ期临床（获得生产文号后）开展是否有新抗原产生的研究。
（四）效果的判定
判断病毒去除/灭活的有效性须综合考虑，不能仅以病毒去除/灭活的量来确定。在确
定有效之前，必须考虑如下因素，审慎评价每次验证结果。
1．验证试验所选择的病毒是否适宜，病毒验证的设计是否合理。
2．病毒降低量（log10）≥4 logs，表示该步骤去除/灭活病毒有效。如因检测方法造成
病毒降低量＜4 logs时，应盲传三代，如无病毒检出，可认定是有效的灭活病毒方法。
3．病毒灭活动力学可更好的显示病毒灭活的效果。病毒灭活通常不是简单的一级反应。往往是起始反应速率快，其后变慢。如果病毒灭活速率随时间明显降低，表示该方法可能无效，或者残留的指示病毒对该灭活方法有抵抗力，说明该步病毒灭活方法无效。
4．病毒实际滴度为基础病毒，指示病毒与样品1:9的比例混匀后零点取样的病毒滴度，通过与经去除/灭活病毒后的测定的实际病毒残留量的比较，作为该病毒去除/灭活方法（步骤）实际的灭活病毒的量。
5．病毒检测敏感度的限值。
举例说明：
（1）加入6 logs 病毒，剩余4 logs 病毒，可将去除/灭活病毒的log数计算在生产全
过程中去除/灭活病毒总量之中，但是就此步（方法）去除/灭活病毒能力而言是无效的。
（2）加入6 logs 病毒，但由于制品本身的细胞毒作用使得检测灵敏度限值为4 logs ，
仅证明除去2 logs 的病毒。在此种情况下需改变试验设计重新进行验证。
（3）加入6 logs 病毒，但仍可测定2 logs 的剩余病毒，且清除病毒的量可重复出，
并不受工艺的影响，应认为是有效的去除/灭活病毒的方法。
（4）加入 6 logs病毒 ，之后未检测出病毒。但是由于检测灵敏度限值为2 logs ，仅
能认为大约清除或灭活了4 logs 病毒。事实上可能等于或大于4 logs ，因此应判定此方法
清除的病毒量≥4 logs。
（5）病毒灭活动力学是非常重要的观察指标。如巴氏消毒法（60℃，10小时），如果病毒残留量很快降到最低检出限度值，说明此方法灭活病毒效果很好。如果病毒灭活速率缓慢，在灭活结束时才达到最低检出限度值，不能认为是一个有效的病毒灭活方法。这就是说，评价验证结果不能仅考虑病毒降低量，同时也要考虑病毒灭活动力学。
四、生产工艺去除/灭活病毒能力的验证
生产工艺去除/灭活病毒能力验证参照特定的去除/灭活病毒方法验证的要求进行。需
要特殊考虑的问题有以下几方面：
（一）只对可能有去除/灭活病毒作用的生产步骤进行验证。
（二）模拟的生产工艺各种参数应尽可能与实际的生产工艺相一致，如pH、温度、蛋白质和其他组成成分的浓度、反应时间、层析柱的柱床高度及流速与床高的比例、洗脱图谱及该步骤的生产效果（如产量、比活性、组成成分）。应分析生产工艺中各种参数的偏差对病毒去除/灭活效果的影响。
（三）生产各步骤对不同类型病毒去除/灭活的选择性。
（四）核酸扩增技术（如PCR）检测病毒核酸的灵敏度比较高，但是该检测技术最大
的局限性是不能区别被灭活了还是未被灭活的病毒。因此该技术不能用于灭活病毒量的验证，只能用于生产过程中病毒去除量的验证。
（五）通常在生产过程中去除/灭活病毒量是可以计算在清除病毒总量中，但不能认定
是有效病毒去除步骤。因为生产过程通常有一些变化，很难控制及验证，而且，病毒分配完全取决于病毒特异的理化性质，这些理化性质影响了病毒与凝胶介质相互作用和沉淀的性质。因此由于病毒表面特性的微小差异（如：糖基化），指示病毒与靶病毒分配形式可能完全不同。在实验室增殖的相关病毒可能在分配上与野生株不同。然而，如果病毒降低量可重复，如果影响病毒分配的各生产参数可以适当地确定和控制，所要的组份能可靠的与一般公认的含病毒组份分开，就可以符合有效步骤的标准（即，认为是有效去除/灭活病毒步骤）。
（六）验证的目的是为了确定生产工艺去除/灭活病毒的能力，获得生产全过程中估计去除/灭活病毒的总量。一般降低的总量是各步降低病毒量的总和。但是由于病毒验证的局限性，如分步骤中病毒降低量≤1 log则不应将其计算在总量中。
五、去除/灭活病毒方法的再验证
以下几种情况需进行病毒去除/灭活方法的再验证：
（一）首次生产者，需对生产工艺中特定的去除/灭活病毒方法进行再验证；
（二）采用新工艺或对原有生产工艺进行了重大改革时，需对生产工艺进行清除病毒
能力验证；对特定的去除/灭活病毒方法进行去除/灭活病毒效果验证；
（三）工艺改变但不属重大工艺改革时，需对特定的去除/灭活病毒方法进行再验证；
（四）被灭活的中间品组成成分或pH值发生改变时，需对特定的去除/灭活病毒方法
进行再验证。
附录：
血液制品病毒去除/灭活验证申报程序
1、国家药品监督管理局授权中国药品生物制品检定所及其它认定的检测实验室进行病毒去除/灭活效果的验证工作。
2、血液制品生产企业应按本技术指导原则的要求对其生产工艺和特定的病毒去除/灭
活方法进行验证。如无条件，可委托其它单位进行去除/灭活病毒效果的验证。
3、血液制品生产企业在完成去除/灭活病毒效果验证后，向中国药品生物制品检定所
提出验证申请，并附制品生产工艺、质量标准、病毒灭活方法及其标准操作细则（SOP）、至少中试规模连续生产的三批病毒灭活前中间品（去除/灭活病毒前的样品）及其制造记录等相关资料。
4、中国药品生物制品检定所对生产单位提交的验证申请及相关的技术资料进行审核；对其提供的三批病毒灭活前的中间品进行与病毒去除/灭活方法相关的参数（如：pH、蛋白质浓度、水分及稳定剂含量、纯度等）的检测。
5、中国药品生物制品检定所及授权认定的检测实验室对生产单位提交的连续生产的三批病毒灭活前的中间品进行病毒灭活方法效果验证。授权认定的检测实验室在验证完成后将验证结果函告中国药品生物制品检定所。
6、在病毒去除/灭活验证的同时或验证后，中国药品生物制品检定所对申报单位提供
的连续生产的三批制品（批号可与病毒验证时报送的制品的批号不同，但必须是采用相同的生产工艺和病毒去除/灭活方法生产的制品）进行全面质量复核（按《中国生物制品规程》及有关的法定标准进行全检，出具检验报告）。
7、采用新的病毒去除/灭活方法时，在资料审查及病毒灭活效果验证结束后，由中国
药品生物制品检定所负责组织血液制品和病毒学等方面专家以及包括药品审评中心在内的相关部门的人员参加的技术论证会，对申报的病毒灭活方法进行论证。
8、验证结束后，中国药品生物制品检定所将去除/灭活病毒验证结果、综合评价意见
及三批制品检定报告回复申报单位；
9、申报单位将申报血液制品拟采用的病毒去除/灭活方法研究资料（包括相关文献）、企业自检报告和中国药品生物制品检定所及授权认定的检测实验室向生产单位提交的病毒去除/灭活方法验证结果、综合评价或论证意见、加入病毒去除/灭活工艺后的制品稳定性考核结果、中国药品生物制品检定所出具的三批制品检定报告等一并上报国家药品监督管理局予以审批。
